来自南丹麦大学、威康桑格研究所和华大基因的研究人员今天在《基因组生物学》杂志上发表了一项研究,比较了单细胞rna测序(scRNA-seq)的文库制备和测序平台。
单细胞转录组学(即scRNA-seq)是一种新一代测序方法,可以同时测量单个细胞中数千个基因的信使RNA浓度(由DNA/基因组/遗传蓝图编码)。这使研究人员能够获得细胞的高分辨率视图,以解开异质性细胞群,并更好地了解体内单个细胞的功能。虽然存在几种单细胞方案,但传统上测序是使用Illumina技术和测序平台进行的。
作者在这里进行了传统Illumina平台与替代BGISEQ-500单细胞转录组短读测序平台的首次比较。作者使用两种不同的协议(SMARTer和Smart-seq2)通过scRNA-seq分析了468个细胞,生成了1297个单细胞文库,用于Illumina HiSeq和BGISEQ-500平台的测序。通过使用两种不同的细胞类型(人类永生化白血病细胞“K562”和小鼠胚胎干细胞“mESCs”)和合成RNA控制序列,作者对不同测序平台的性能进行了基准测试。研究发现,BGISEQ-500在检测RNA分子的灵敏度、准确性和可重复性方面与Illumina平台具有高度可比性
虽然测序试剂和人员成本受到地理限制,但BGISEQ-500通常以较低的成本具有更高的数据吞吐量。该论文的共同主要作者蒋淼淼博士指出:“更高的吞吐量和每通道略微增加的成本的结合,使bgiiseq -500成为scRNA-seq项目的一个有吸引力的替代方案,在这些项目中,需要大量的多路传输以及每个细胞的可观读取深度。”
“这是第一次将Illumina HiSeq与BGISeq-500测序平台进行单细胞rna测序的比较研究,为研究人员提供了另一种测序选择。我们的研究发现,两个平台之间的比较指标表现非常相似。这对大规模单细胞测序计划非常有用,可以生成所有人类细胞类型的参考图谱,增强我们对人类健康的理解。”
来源:https://www.sdu.dk/en
点击分享到









